O objetivo deste estudo foi avaliar os efeitos da substituição parcial de milho moído e farelo de soja por grãos de destilaria de milho com solúveis (DDGS) na produção e no metabolismo ruminal de vacas leiteiras. Dois experimentos foram conduzidos utilizando dietas isoproteicas, com proporção volumoso:concentrado de 60:40. No Experimento 1, vinte vacas da raça Holandesa em início de lactação (15 ± 4 d; 26,7 ± 5,5 L/dia) confinadas em barracão free-stall, distribuídas em um delineamento experimental em blocos casualizados, alimentadas com uma de duas dietas experimentais: Controle (CON), contendo milho moído e farelo de soja como principais fontes de energia e proteína; e uma dieta na qual 17,5% de DDGS substituiu parcialmente esses ingredientes. Não houve efeito significativo com a inclusão de DDGS para os parâmetros de consumo de mateira seca (P = 0,7), produção de leite (28,5 vs. 28,54 kg/dia) e excreção dos componentes do leite ou o escore de condição corporal. Observou-se uma tendência de aumento (P = 0,09) no nitrogênio ureico do leite (NUL) para o tratamento com DDGS (13,5 vs. 12,5 mg/dL). No Experimento 2, quatro vacas Holandesas canuladas no rúmen confinadas e distribuídas em um delineamento switch-back para avaliar os mesmos tratamentos. A inclusão de DDGS não alterou o pH ruminal, a concentração de amônia ou a concentração total de ácidos graxos de cadeia curta (AGCC). Contudo, aumentou (P = 0,003) a proporção molar de propionato e, consequentemente, reduziu a relação acetato:propionato (P = 0,001). Conclui-se que a inclusão de 17,5% de DDGS na dieta de vacas leiteiras no terço inicial da lactação, manteve o desempenho produtivo sem afetar a produção de leite e seus componentes, mantendo um perfil de fermentação ruminal estável.

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